農(nóng)業(yè)部辦公廳

農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于印發(fā)《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》和《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》的通知

農(nóng)辦牧[2011]21號


　　為規(guī)范飼料和飼料添加劑安全性評價(jià)和有效性試驗(yàn)工作，保證試驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性、客觀性，根據(jù)《飼料和飼料添加劑管理?xiàng)l例》、《新飼料和新飼料添加劑管理辦法》和《進(jìn)口飼料和飼料添加劑登記管理辦法》有關(guān)規(guī)定，我部委托全國飼料評審委員會制定了《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》和《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》�，F(xiàn)印發(fā)你們，請參照執(zhí)行。

　　附件：

　　1.《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》

　　2.《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）》


　　二〇一一年六月十七日



附件1：


飼料和飼料添加劑畜禽靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）

1 適用范圍
1.1本指南規(guī)定了飼料原料和飼料添加劑畜禽靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)的基本原則、試驗(yàn)方案、試驗(yàn)方法和試驗(yàn)報(bào)告等要求。
1.2本指南適用于為新飼料和飼料添加劑、進(jìn)口飼料和飼料添加劑申報(bào)以及已經(jīng)批準(zhǔn)使用的飼料和飼料添加劑再評價(jià)而進(jìn)行的畜禽靶動物體內(nèi)有效性評價(jià)試驗(yàn)。
1.3 畜禽飼料產(chǎn)品的靶動物體內(nèi)有效性評價(jià)試驗(yàn)可參照本指南的要求進(jìn)行。
2 基本原則
2.1應(yīng)根據(jù)我國的養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)際開展靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)，以保證評價(jià)結(jié)果的科學(xué)性、客觀性。
2.2靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)對受試物所適用的每一種靶動物分別進(jìn)行評價(jià)，本指南4.2.2以及其他另有規(guī)定的特殊情況除外。
2.3 靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)由具備一定專業(yè)知識和試驗(yàn)技能的專業(yè)人員在適宜的試驗(yàn)場所、使用適宜的設(shè)備設(shè)施、按照規(guī)范的操作程序進(jìn)行，并且由試驗(yàn)機(jī)構(gòu)指定的負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。用于產(chǎn)品申報(bào)的，評價(jià)機(jī)構(gòu)和人員的要求另行規(guī)定。
2.4試驗(yàn)動物應(yīng)健康并且具有相似的遺傳背景；飼養(yǎng)環(huán)境不應(yīng)對試驗(yàn)結(jié)果造成影響；受試物和試驗(yàn)日糧不得受到污染。
2.5在符合靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)相關(guān)要求的前提下，靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)可與靶動物耐受性試驗(yàn)合并進(jìn)行。
2.6試驗(yàn)應(yīng)證明受試物最低推薦用量的有效性，一般通過設(shè)定負(fù)對照和選擇敏感靶指標(biāo)進(jìn)行。必要時(shí)設(shè)正對照。
2.7當(dāng)有效性評價(jià)試驗(yàn)的目的是證明受試物能為靶動物提供營養(yǎng)素時(shí)，應(yīng)設(shè)置一個該營養(yǎng)素水平低于動物需求、但又不至嚴(yán)重缺乏的對照日糧。
2.8 應(yīng)采用梯度劑量設(shè)計(jì)，為推薦用量或用量范圍的確定提供依據(jù)。
有效性評價(jià)試驗(yàn)的梯度水平不得少于3個；但作為產(chǎn)品申報(bào)的，奶牛試驗(yàn)的梯度水平不得少于4個，其他動物不得少于5個。
2.9 由于試驗(yàn)條件和受試物特性的限制，可以進(jìn)行多個有效性評價(jià)試驗(yàn)以證明受試物的有效性。當(dāng)試驗(yàn)次數(shù)超過3次時(shí)，建議采用整合分析法（meta-analysis）進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，但每次試驗(yàn)應(yīng)采用相似的設(shè)計(jì)，以保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的可比性。
3 試驗(yàn)方案
試驗(yàn)開始前，應(yīng)根據(jù)受試物和靶動物的特點(diǎn)，對試驗(yàn)進(jìn)行系統(tǒng)設(shè)計(jì)，形成試驗(yàn)方案。試驗(yàn)方案應(yīng)包括試驗(yàn)?zāi)康摹⒃囼?yàn)方法、儀器設(shè)備、詳細(xì)的動物品種和類別、動物數(shù)量、飼養(yǎng)和飼喂條件等，并由試驗(yàn)負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。具體要求如下：
3.1試驗(yàn)動物：品種、年齡、性別、生理階段和一般健康狀況；
3.2試驗(yàn)條件：動物來源和種群規(guī)模、飼養(yǎng)條件、飼喂方式；預(yù)飼期的條件要求；
3.3試驗(yàn)分組：試驗(yàn)組和對照組數(shù)量、每組重復(fù)數(shù)和每個重復(fù)的動物數(shù)（必須滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求）、統(tǒng)計(jì)方法；
3.4試驗(yàn)日糧：描述日糧的加工方法、日糧組成及相關(guān)的營養(yǎng)成分含量（實(shí)測值）和能量水平；注意根據(jù)受試物特點(diǎn)和使用方法配制日糧，使用的原料應(yīng)符合我國法規(guī)和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，各試驗(yàn)處理組試驗(yàn)因子以外的其他因素（如：料型、粒度、加工工藝等）應(yīng)一致；
3.5受試物的測定：受試物及其有效成分的通用名稱、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號、有效成分含量的測試方法及測試結(jié)果、測試機(jī)構(gòu)，受試物有效成分在試驗(yàn)日糧中的含量；
3.6觀測項(xiàng)目和時(shí)間：檢測和觀察項(xiàng)目名稱、實(shí)施和持續(xù)的確切時(shí)間；
3.7疾病治療和預(yù)防措施：不應(yīng)干擾受試物的作用模式并逐一記錄；
3.8突發(fā)狀況處理：動物個體和各試驗(yàn)組發(fā)生的所有非預(yù)期的突發(fā)狀況，都應(yīng)記錄其發(fā)生的時(shí)間和范圍。
4、試驗(yàn)方法
4.1受試物
4.1.1對于申請產(chǎn)品審定或登記的受試物，應(yīng)與擬上市（或擬進(jìn)口）的產(chǎn)品完全一致。產(chǎn)品應(yīng)由申報(bào)單位自行研制并在中試車間或生產(chǎn)線生產(chǎn)，同時(shí)提供產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和使用說明。
4.1.2試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)將受試物樣品送國家或農(nóng)業(yè)部認(rèn)可的質(zhì)檢機(jī)構(gòu)對其有效成分的含量進(jìn)行實(shí)際測定。
4.2 有效性評價(jià)試驗(yàn)的基本類型
受試物的靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)一般分為長期有效性評價(jià)試驗(yàn)和短期有效性評價(jià)試驗(yàn)。消化率或氮、磷減排等指征明確的指標(biāo)可通過短期有效性評價(jià)試驗(yàn)進(jìn)行測定，生長性能、飼料轉(zhuǎn)化效率、產(chǎn)奶量、產(chǎn)蛋性能、胴體組成和繁殖性能等一般性指標(biāo)必須通過長期有效性評價(jià)試驗(yàn)進(jìn)行測定。
4.2.1 短期有效性評價(jià)試驗(yàn)
4.2.1.1生物有效性、生物等效性、消化和平衡試驗(yàn)均屬于短期有效性評價(jià)試驗(yàn)。必要時(shí)，也可進(jìn)行其他短期有效性評價(jià)試驗(yàn)。短期有效性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)遵循公認(rèn)的方法進(jìn)行。
4.2.1.2 生物有效性是指活性物質(zhì)或代謝產(chǎn)物被吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)到靶細(xì)胞或靶組織并表現(xiàn)出的典型功能或效應(yīng)。生物有效性應(yīng)通過可觀察或可測量的生物、化學(xué)或功能性特異指標(biāo)進(jìn)行評價(jià)。
4.2.1.3 生物等效性試驗(yàn)用于評價(jià)可能在靶動物體內(nèi)具有相同生物學(xué)作用的兩種受試物。如果兩種受試物所有相關(guān)效果均相同，則可認(rèn)為具有生物等效性。
4.2.1.4 消化試驗(yàn)可用于評價(jià)受試物對靶動物體內(nèi)某種營養(yǎng)素消化率（如表觀消化率、真消化率、回腸消化率）的影響。
4.2.1.5 平衡試驗(yàn)還可獲得營養(yǎng)素在靶動物體內(nèi)沉積和排出數(shù)量等額外數(shù)據(jù)。
4.2.2 長期有效性評價(jià)試驗(yàn)
4.2.2.1 應(yīng)針對受試物適用的靶動物，按照規(guī)定的試驗(yàn)期、試驗(yàn)重復(fù)數(shù)和動物數(shù)量的要求開展長期有效性評價(jià)試驗(yàn)。具體要求見附錄A。試驗(yàn)分組應(yīng)遵循隨機(jī)和局部控制的原則。
4.2.2.2 附錄A中沒有列出的其他動物品種，長期有效性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)參照生理和生產(chǎn)階段相似物種的要求進(jìn)行。
4.2.2.3 如果受試物僅適用于動物的特定生長階段并且短于附錄A中規(guī)定的試驗(yàn)期，試驗(yàn)時(shí)間應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整，但不得少于28天，而且應(yīng)考察相關(guān)的特異性指標(biāo)。
4.2.2.4 長期有效性評價(jià)試驗(yàn)的必測指標(biāo)包括：試驗(yàn)開始和結(jié)束體重、飼料采食量、死亡率和發(fā)病率。
其他指標(biāo)根據(jù)動物品種和受試物的特殊功效確定。如果需要測定產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋性能，則應(yīng)分別提供有關(guān)奶成分和蛋品質(zhì)的數(shù)據(jù)。
4.2.2.5 在評價(jià)受試物對養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量的影響時(shí)，長期有效性評價(jià)試驗(yàn)也可用來采集相關(guān)樣品。
4.3觀察與檢測
4.3.1應(yīng)根據(jù)受試物的作用特點(diǎn)和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)。
4.3.2應(yīng)按照國家標(biāo)準(zhǔn)、國際認(rèn)可方法或經(jīng)確證的文獻(xiàn)報(bào)道方法確定檢測方法。如果采用文獻(xiàn)報(bào)道方法或新建方法，應(yīng)提供方法確證的數(shù)據(jù)資料，說明其合理性。
4.4 數(shù)據(jù)記錄
4.4.1在試驗(yàn)實(shí)施過程中，試驗(yàn)方案所涉及的內(nèi)容均應(yīng)逐一記錄。數(shù)據(jù)記錄應(yīng)真實(shí)、準(zhǔn)確、完整、規(guī)范、清晰，并妥善保管。
4.4.2數(shù)據(jù)的有效位數(shù)以所用儀器的精度為準(zhǔn)，采用國家法定計(jì)量單位和國家推薦使用的單位。
4.5 統(tǒng)計(jì)分析
4.5.1以重復(fù)為單位，根據(jù)不同的試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
4.5.2統(tǒng)計(jì)顯著性差異水平至少應(yīng)達(dá)到P<0.05。
5試驗(yàn)報(bào)告
5.1試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)提供試驗(yàn)獲取的所有數(shù)據(jù)，包括所有試驗(yàn)動物和試驗(yàn)重復(fù)。統(tǒng)計(jì)分析中未采用的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價(jià)的情況也應(yīng)報(bào)告，并說明在各組別中的分布情況。
5.2每個靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)必須單獨(dú)形成最終報(bào)告。每個試驗(yàn)最終報(bào)告中應(yīng)包含試驗(yàn)概述（見附錄B）和報(bào)告正文。
5.3試驗(yàn)報(bào)告正文至少應(yīng)包括：
A、試驗(yàn)名稱；
B、摘要；
C、試驗(yàn)?zāi)康模?br> D、受試物；
E、試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)；
F、試驗(yàn)材料和方法；
G、結(jié)果與討論；
H、結(jié)論；
I、原始數(shù)據(jù)及相關(guān)的圖表和照片；統(tǒng)計(jì)分析中未采用的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價(jià)的情況應(yīng)具體說明；
J、參考文獻(xiàn)；
K、試驗(yàn)機(jī)構(gòu)和操作人員，包括試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的名稱，試驗(yàn)操作人員、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人和報(bào)告簽發(fā)人的簽名，報(bào)告簽發(fā)時(shí)間，加蓋簽發(fā)機(jī)構(gòu)的單位公章或?qū)ｉT的分析測試章；委托檢測的數(shù)據(jù)應(yīng)提供檢測機(jī)構(gòu)出具的檢測報(bào)告。
5.4 應(yīng)對試驗(yàn)報(bào)告每頁進(jìn)行編碼，格式為“第 頁，共 頁”， 并加蓋試驗(yàn)機(jī)構(gòu)騎縫章，確保報(bào)告的完整性。
6 資料存檔
最終報(bào)告、原始記錄、圖表和照片、試驗(yàn)方案、受試物樣品及其檢測報(bào)告等原始資料應(yīng)存檔備查，保存時(shí)間一般不得少于5年，作為產(chǎn)品申報(bào)的，保存時(shí)間至少為10年。






附錄A：試驗(yàn)期和動物數(shù)量
表1. 豬
類 別 試驗(yàn)階段*（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)
和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
哺乳仔豬 出生 21~42 6~11 14天 每個處理6個有效重復(fù)，每個重復(fù)6頭，性別比例相同
斷奶仔豬 21~42日齡 120 35 28天
哺乳和
斷奶仔豬 出生 120 35 42天
生長
育肥豬 ≤35 kg 120~250（或根據(jù)當(dāng)?shù)亓?xí)慣） 80~150 （或根據(jù)當(dāng)?shù)亓?xí)慣直到屠宰體重） 70天
繁殖母豬 初次受精 受精至斷奶，至少兩個繁殖周期 每個處理20個有效重復(fù)，每個重復(fù)1頭
泌乳母豬 分娩前兩周至斷奶
注：
* 試驗(yàn)階段：指試驗(yàn)用動物所處的生長階段，最短試驗(yàn)期應(yīng)處于所對應(yīng)的試驗(yàn)階段。
表2. 家禽
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
肉仔雞 出殼 35天 1.6~2.4 35天 每個處理6個有效重復(fù)，每個重復(fù)15只，性別比例相同
蛋用雛雞 出殼 16(20)周齡 112天*
產(chǎn)蛋雞 16~21周齡 13（18）月齡 168天
肉鴨 出殼 35天 35天
產(chǎn)蛋鴨 25周齡 50周齡 168天
育肥用火雞 出殼 母：4(20)周齡
公：16(24)周齡 母：7~10
公：12~20 84天
種用火雞 開始產(chǎn)蛋（30周齡） 60周齡 6個月
后備
種用火雞 出殼 30周齡 母：15
公：30 全程**
注：
* 僅當(dāng)肉仔雞的有效性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法提供時(shí)進(jìn)行
** 僅當(dāng)育肥用火雞的有效性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法提供時(shí)進(jìn)行
表3. 牛（包括水牛）
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
犢牛 出生或者60~80 kg 4月齡 145 56天 每個處理15個有效重復(fù)，每個重復(fù)1頭，性別比例相同
生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛 出生 6月齡 180（250）或直到屠宰體重 84天
育肥牛 瘤胃發(fā)育完全（至少完全斷奶） 10~36月齡 350~700 126天
泌乳奶牛 84天*
繁殖母牛 初次受精 受精至斷奶，至少兩個繁殖周期**
注：
* 需報(bào)告整個泌乳期情況
** 僅當(dāng)需要測定繁殖指標(biāo)時(shí)進(jìn)行
表4. 綿羊
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
育成羔羊 出生 3月齡 15~20 56天 每個處理15個有效重復(fù)，每個重復(fù)1只，性別比例相同
育肥羔羊 出生 6月齡或以上 40或直到屠宰體重 56天
泌乳
奶綿羊 49天*
繁殖綿羊 初次受精 受精至斷奶，至少兩個繁殖周期**
育肥綿羊 6月齡 42天
注：
* 需報(bào)告整個泌乳期情況
** 僅當(dāng)需要測定繁殖指標(biāo)時(shí)進(jìn)行

表5. 山羊
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
育成羔羊 出生 3月齡 15~20 56天 每個處理15個有效重復(fù)，每個重復(fù)1只，性別比例相同
育肥羔羊 出生 6月齡或以上 40或直到屠宰體重 56天
泌乳
奶山羊 84天*
繁殖山羊 初次受精 受精至斷奶，至少兩個繁殖周期**
育肥山羊 6月齡 42天
注：
* 需報(bào)告整個泌乳期情況
**僅當(dāng)需要測定繁殖指標(biāo)時(shí)進(jìn)行
表6. 家兔
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期 最少試驗(yàn)重復(fù)和動物數(shù)量
起始 結(jié)束日齡
哺乳和斷奶兔 出生后一周 56天 每個處理6個有效重復(fù)，每個重復(fù)4只，性別比例相同
育肥兔 斷奶后 8~11周 42天
繁殖母兔 從受精開始 受精至斷奶，至少為兩個繁殖周期*
泌乳母兔 第一次受精 分娩前2周至斷奶
注：
* 僅當(dāng)需要測定繁殖指標(biāo)時(shí)進(jìn)行

附錄B：試驗(yàn)概述表
試驗(yàn)編號： 第1頁，共 頁
受
試
物 受試物通用名稱： 有效成分：
有效成分標(biāo)示值： 有效成分實(shí)測值：
產(chǎn)品類別： 外觀性狀：
生產(chǎn)單位： 生產(chǎn)日期及批號：
樣品數(shù)量及包裝規(guī)格： 保質(zhì)期：
收(抽)樣日期： 送(抽)樣人：
抽樣地點(diǎn)：（適用時(shí)） 抽樣基數(shù)：（適用時(shí)）
試驗(yàn)
動物 試驗(yàn)動物品種：
性別： 生理階段：
起始日齡： 起始體重：
健康狀況：
動物來源和種群規(guī)模： 飼喂方式：
飼養(yǎng)條件：
時(shí)間
與
場所 試驗(yàn)起始時(shí)間： 試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間：
試驗(yàn)場所：
設(shè)計(jì)
與
分組 分組設(shè)計(jì)方法：
試驗(yàn)組數(shù)量(含對照組)： 每組重復(fù)數(shù)：
每個重復(fù)動物數(shù)： 試驗(yàn)動物總數(shù)：
日糧中有效成分添加量 日糧中有效成分含量
試驗(yàn)組1
試驗(yàn)組2
試驗(yàn)組3
……
對照物質(zhì)名稱：
(適用時(shí)) 對照物質(zhì)在日糧中添加量 對照物質(zhì)在日糧中含量

試驗(yàn)
日糧 日糧組成(營養(yǎng)素和能值)
計(jì)算值 實(shí)測值
成分1
成分2
成分3
……
日糧形態(tài) 粉料□ 顆�！� 膨化□ 其他
檢測項(xiàng)目
和
實(shí)施時(shí)間
治療和預(yù)防措施
(原因、時(shí)間、種類、持續(xù)時(shí)間等)
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
分析方法
突發(fā)狀況的處理、不良后果發(fā)生的時(shí)間及發(fā)生范圍：
結(jié)論
原始
記錄
保管
備注

試驗(yàn)人員：



項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：



報(bào)告簽發(fā)人及簽發(fā)時(shí)間：





附件2：

飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)指南（試行）


1適用范圍
1.1本指南規(guī)定了飼料原料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)的基本原則、試驗(yàn)方案、試驗(yàn)方法和試驗(yàn)報(bào)告等要求。
1.2本指南適用于為新飼料和飼料添加劑、進(jìn)口飼料和飼料添加劑申報(bào)以及已經(jīng)批準(zhǔn)使用的飼料和飼料添加劑再評價(jià)而進(jìn)行的畜禽靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)。
1.3 畜禽飼料產(chǎn)品的靶動物體內(nèi)耐受性評價(jià)試驗(yàn)可參照本指南的要求進(jìn)行。
2基本原則
2.1靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)的目的是為飼料和飼料添加劑（以下簡稱為“受試物”）對靶動物的短期毒性提供有限評價(jià)；當(dāng)受試物使用劑量超出推薦用量時(shí)，也可用來確立受試物的安全范圍。
2.2應(yīng)根據(jù)中國的養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)際開展靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)，以保證評價(jià)結(jié)果的科學(xué)性、客觀性。
2.3靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)對受試物所適用的每一種靶動物分別進(jìn)行評價(jià)， 本指南4.3以及其他另有規(guī)定的特殊情況除外。
2.4 靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)由具備一定專業(yè)知識和試驗(yàn)技能的專業(yè)人員在適宜的試驗(yàn)場所、使用適宜的設(shè)備設(shè)施、按照規(guī)范的操作程序進(jìn)行，并且由試驗(yàn)機(jī)構(gòu)指定的負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。用于產(chǎn)品申報(bào)的，評價(jià)機(jī)構(gòu)和人員的要求另行規(guī)定。
2.5試驗(yàn)動物應(yīng)健康并且具有相似的遺傳背景；飼養(yǎng)環(huán)境不應(yīng)對試驗(yàn)結(jié)果造成影響；受試物和試驗(yàn)日糧不得受到污染。
2.6在符合靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)相關(guān)要求的前提下，靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)可與靶動物有效性評價(jià)試驗(yàn)合并進(jìn)行。
2.7 靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)充分考慮實(shí)驗(yàn)動物毒理學(xué)研究的結(jié)果。
3 試驗(yàn)方案
試驗(yàn)開始前，應(yīng)根據(jù)受試物和靶動物的特點(diǎn)，對試驗(yàn)進(jìn)行系統(tǒng)設(shè)計(jì)，形成試驗(yàn)方案。試驗(yàn)方案應(yīng)包括試驗(yàn)?zāi)康�、試�?yàn)方法、儀器設(shè)備、詳細(xì)的動物品種和類別、動物數(shù)量、飼養(yǎng)和飼喂條件等，并由試驗(yàn)負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。具體要求如下：
3.1試驗(yàn)動物：品種、年齡、性別、生理階段和一般健康狀況；
3.2試驗(yàn)條件：動物來源和種群規(guī)模、飼養(yǎng)條件、飼喂方式；預(yù)飼期的條件要求；
3.3試驗(yàn)分組：試驗(yàn)組和對照組數(shù)量、每組重復(fù)數(shù)和每個重復(fù)的動物數(shù)（必須滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求）、統(tǒng)計(jì)方法；
3.4試驗(yàn)日糧：描述日糧的加工方法、日糧組成及相關(guān)的營養(yǎng)成分含量（實(shí)測值）和能量水平；注意根據(jù)受試物特點(diǎn)和使用方法配制日糧，使用的原料應(yīng)符合我國法規(guī)和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，各試驗(yàn)處理組試驗(yàn)因子以外的其他因素（如：料型、粒度、加工工藝等）應(yīng)一致；
3.5受試物的測定：受試物及其有效成分的通用名稱、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號、有效成分含量的測試方法及測試結(jié)果、測試機(jī)構(gòu)，受試物有效成分在試驗(yàn)日糧中的含量；
3.6觀測項(xiàng)目和時(shí)間：檢測和觀察項(xiàng)目名稱、實(shí)施和持續(xù)的確切時(shí)間；
3.7疾病治療和預(yù)防措施：不應(yīng)干擾受試物的作用模式并逐一記錄；
3.8突發(fā)狀況處理：動物個體和各試驗(yàn)組發(fā)生的所有非預(yù)期的突發(fā)狀況，都應(yīng)記錄其發(fā)生的時(shí)間和范圍。
4.試驗(yàn)方法
4.1受試物
4.1.1對于申請產(chǎn)品審定或登記的受試物，應(yīng)與擬生產(chǎn)（或擬進(jìn)口）的產(chǎn)品完全一致。產(chǎn)品應(yīng)由申報(bào)單位自行研制并在中試車間或生產(chǎn)線生產(chǎn)，同時(shí)提供產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和使用說明。
4.1.2試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)將受試物樣品送國家或農(nóng)業(yè)部認(rèn)可的質(zhì)檢機(jī)構(gòu)對其有效成分的含量進(jìn)行實(shí)際測定。
4.2劑量與分組
4.2.1試驗(yàn)分組：靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)至少要包括三個組，即對照組、有效劑量組、多倍劑量組。
4.2.2試驗(yàn)劑量
對照組通常不應(yīng)含有受試物，但是，對于某些動物機(jī)體的必需營養(yǎng)素（如氨基酸、維生素、微量元素等），可以添加，但添加量應(yīng)維持在最低必需水平。
一般情況下，有效劑量組應(yīng)該選用最高限量。如果沒有最高限量，應(yīng)選用最高推薦劑量。如果沒有最高推薦量，應(yīng)根據(jù)受試物的自身特性，選擇最低推薦劑量的2-5倍作為有效劑量。
多倍劑量組一般選用上述有效劑量的10倍。
如果受試物的耐受劑量低于有效劑量的10倍，耐受性評價(jià)試驗(yàn)應(yīng)能通過尸檢、組織病理學(xué)以及其他適宜的試驗(yàn)方法提出反映受試物毒性的特異性指標(biāo)，并計(jì)算出受試物的安全系數(shù)。
4.2.3試驗(yàn)重復(fù)數(shù)：各試驗(yàn)組和對照組的試驗(yàn)重復(fù)數(shù)（或動物數(shù)）必須滿足數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析的要求。一般情況下，每組重復(fù)數(shù)不能少于6個，其中豬、羊、牛等家畜1個動物即可為1個重復(fù)，而小動物（如家禽、兔等）則要求每個重復(fù)的動物數(shù)不能少于10只。性別比例應(yīng)相同。
4.3試驗(yàn)期
4.3.1豬：哺乳仔豬的試驗(yàn)應(yīng)在出生14天之后至斷奶前進(jìn)行，生長育肥豬試驗(yàn)開始體重應(yīng)不大于35 kg。如果哺乳仔豬和斷奶仔豬均需要進(jìn)行耐受性評價(jià)試驗(yàn)，采用一個組合試驗(yàn)即可，試驗(yàn)期為斷奶前14天到斷奶后28天。如果已進(jìn)行了斷奶仔豬的耐受性評價(jià)試驗(yàn)，則不必再進(jìn)行生長育肥豬的耐受性評價(jià)試驗(yàn)。
4.3.2家禽：肉仔雞、蛋用雛雞和育肥用火雞的試驗(yàn)一般選用1日齡雛禽。肉仔雞獲得的靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以外推至蛋用和種用雛雞，肉用火雞的數(shù)據(jù)也可外推至蛋用和種用火雞。產(chǎn)蛋家禽的試驗(yàn)一般選擇在前1/3產(chǎn)蛋期進(jìn)行。
4.3.3牛：生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛的試驗(yàn)應(yīng)選用體重不超過70 kg的犢牛。如果犢牛和育肥牛均需要進(jìn)行靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)，開展一個組合試驗(yàn)即可，每個階段各28天。
4.3.4家兔：如果哺乳期和斷奶期的家兔都需進(jìn)行耐受性評價(jià)試驗(yàn)，試驗(yàn)應(yīng)自仔兔出生后1周開始，試驗(yàn)時(shí)間不少于49天，并且母兔應(yīng)與仔兔一同飼養(yǎng)直至斷奶。
4.3.5其他
4.3.5.1靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)需要的最短試驗(yàn)期取決于適用動物的種類和生長階段，具體要求見附錄A。對于附錄A中未列出的動物，生長期動物的試驗(yàn)期至少為28天，成年動物至少為42天。
4.3.5.2如果受試物僅適用于動物的特定生長階段并且短于附錄A中規(guī)定的試驗(yàn)期，試驗(yàn)時(shí)間應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整，但不得少于28天，而且應(yīng)考察相關(guān)的特異性指標(biāo)（如：若在妊娠母豬上使用，應(yīng)考察產(chǎn)活仔數(shù)；若在泌乳母豬上使用，則應(yīng)考察斷奶仔豬的體重和斷奶成活率等）。
4.4觀察與檢測
4.4.1臨床觀察
試驗(yàn)期內(nèi)應(yīng)每天觀察試驗(yàn)動物臨床表現(xiàn)、采食和飲水情況、生長情況以及相關(guān)動物產(chǎn)品的產(chǎn)量和特性。也應(yīng)詳細(xì)觀察和記錄不良反應(yīng)。對試驗(yàn)中出現(xiàn)的不明原因的死亡應(yīng)進(jìn)行尸檢，如果可能，最好進(jìn)行組織學(xué)分析。
4.4.2血液學(xué)檢測
試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束（必要時(shí)增加試驗(yàn)中期）時(shí)每組隨機(jī)抽檢一定數(shù)量的動物，性別比例適當(dāng)，分別采集血樣進(jìn)行血液常規(guī)、生化指標(biāo)及其他與受試物相關(guān)的各種生理參數(shù)的檢測。
血液常規(guī)指標(biāo)主要包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）等指標(biāo)；生化指標(biāo)主要指谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TPRO）、白蛋白（ALB）、尿素氮（UN）、肌酐（CRE）、血糖（GLU）、總膽紅素（TBILI）等指標(biāo)。
4.4.3組織病理學(xué)檢查
4.4.3.1尸體解剖學(xué)檢查：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組屠宰一定數(shù)量的試驗(yàn)動物(性別比例適當(dāng))，進(jìn)行系統(tǒng)尸體解剖學(xué)檢查，為進(jìn)一步的組織學(xué)檢查提供依據(jù)。
4.4.3.2臟器系數(shù)測定：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組隨機(jī)屠宰一定數(shù)量動物(性別比例適當(dāng))，剖檢取心、肝、脾、肺、腎等臟器稱重，并計(jì)算各器官與體重的比值。
4.4.3.3組織病理學(xué)檢查：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對多倍劑量組及尸檢異常動物的主要器官進(jìn)行系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查，詳細(xì)檢查的器官和組織包括：心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、胃、十二指腸、回腸、直腸、淋巴結(jié)、骨髓等組織。
4.4.4其他特異性觀測指標(biāo)
根據(jù)受試物的作用特點(diǎn)和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)。
4.5數(shù)據(jù)記錄
4.5.1在試驗(yàn)實(shí)施過程中，試驗(yàn)方案所涉及的內(nèi)容均應(yīng)逐一記錄。數(shù)據(jù)記錄應(yīng)真實(shí)、準(zhǔn)確、完整、規(guī)范、清晰，并妥善保管。
4.5.2數(shù)據(jù)的有效位數(shù)以所用儀器的精度為準(zhǔn)，采用國家法定計(jì)量單位和國家推薦使用的單位。
4.6統(tǒng)計(jì)分析
4.6.1以重復(fù)為單位，根據(jù)不同的試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
4.6.2統(tǒng)計(jì)顯著性差異水平至少應(yīng)達(dá)到P<0.05。
5試驗(yàn)報(bào)告
5.1試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)提供試驗(yàn)獲取的所有數(shù)據(jù)，包括所有試驗(yàn)動物和試驗(yàn)重復(fù)。未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價(jià)的情況也應(yīng)報(bào)告，并說明在各組別中的分布情況。
5.2每個靶動物耐受性評價(jià)試驗(yàn)必須單獨(dú)形成最終報(bào)告。每個試驗(yàn)最終報(bào)告中應(yīng)包含試驗(yàn)概述（見附錄B）和報(bào)告正文。
5.3試驗(yàn)報(bào)告正文至少應(yīng)包括：
A、試驗(yàn)名稱；
B、摘要；
C、試驗(yàn)?zāi)康模?br> D、受試物；
E、試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)；
F、試驗(yàn)材料和方法；
G、結(jié)果與討論；
H、結(jié)論；
I、原始數(shù)據(jù)及相關(guān)的圖表和照片；未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價(jià)的情況應(yīng)具體說明；
J、參考文獻(xiàn)；
K、試驗(yàn)機(jī)構(gòu)和操作人員，包括試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的名稱，試驗(yàn)操作人員、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人和報(bào)告簽發(fā)人的簽名，報(bào)告簽發(fā)時(shí)間，加蓋簽發(fā)機(jī)構(gòu)的單位公章或?qū)ｉT的分析測試章；委托檢測的數(shù)據(jù)應(yīng)提供檢測機(jī)構(gòu)出具的檢測報(bào)告。
5.4 應(yīng)對試驗(yàn)報(bào)告每頁進(jìn)行編碼，格式為“第 頁，共 頁”， 并加蓋騎縫章，確保報(bào)告的完整性。
6資料存檔
最終報(bào)告、原始記錄、圖表和照片、試驗(yàn)方案、受試物樣品及其檢測報(bào)告等原始資料應(yīng)存檔備查，保存時(shí)間一般不得少于5年，作為產(chǎn)品申報(bào)的，保存時(shí)間至少為10年。

附錄A：試驗(yàn)期
表1. 豬
類 別 試驗(yàn)階段*（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
哺乳仔豬 14日齡 21~42 6~11 14天
斷奶仔豬 21~42日齡 120 35 28天
哺乳和
斷奶仔豬 14日齡 120 35 42天
生長
育肥豬 ≤35 kg 120~250（或根據(jù)當(dāng)?shù)亓?xí)慣） 80~150 （或根據(jù)當(dāng)?shù)亓?xí)慣） 42天**
繁殖母豬 初次受精 受精至斷奶，至少一個繁殖周期
泌乳母豬 分娩前兩周至斷奶
注：
* 試驗(yàn)階段：指試驗(yàn)用動物所處的生長階段，最短試驗(yàn)期應(yīng)處于所對應(yīng)的試驗(yàn)階段
**如果已有斷奶仔豬的耐受性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，則不必再進(jìn)行生長育肥豬的耐受性評價(jià)試驗(yàn)
表2. 家禽
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
肉仔雞 出殼 35天 1.6~2.4 35天
蛋用雛雞 出殼 16(20)周齡 35天*
產(chǎn)蛋雞 16~21周齡 13（18）月齡 56天**
育肥用火雞 出殼 母：14(20)周齡
公：16(24)周齡 母：7~10
公：12~20 42天
種用火雞 開始產(chǎn)蛋（30周齡） 60周齡 56天
后備種用火雞 出殼 30周齡 母：15
公：30 42天***
注：
* 僅當(dāng)肉仔雞的耐受性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法提供時(shí)進(jìn)行
**最好在開產(chǎn)后的前1/3產(chǎn)蛋期進(jìn)行
***僅當(dāng)育肥用火雞的耐受性評價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法提供時(shí)進(jìn)行
表3. 牛（包括水牛）
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
犢牛 出生或60-80 kg 4月齡 145 42天
生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛 <70 kg 6月齡 180（250） 28天
育肥牛 瘤胃發(fā)育完全（至少完全斷奶） 10~36月齡 350~700 42天
泌乳奶牛 56天
繁殖母牛 初次受精 受精至斷奶，至少一個繁殖周期
表4. 綿羊
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
育成羔羊 出生 3月齡 15~20 28天
育肥羔羊 出生 6月齡或以上 40 28天
泌乳奶綿羊 42天
繁殖綿羊 初次受精 受精至斷奶，至少一個繁殖周期
表5. 山羊
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
起始 結(jié)束日齡 結(jié)束體重（kg）
育成羔羊 出生 3月齡 15~20 28天
育肥羔羊 出生 6月齡或以上 40 28天
泌乳奶山羊 42天
繁殖山羊 初次受精 受精至斷奶，至少一個繁殖周期
表6. 家兔
類 別 試驗(yàn)階段（體重或日齡） 最短試驗(yàn)期
開始 結(jié)束日齡
哺乳和斷奶兔 出生后一周 49天
育肥兔 斷奶后 8~11周 28天
繁殖母兔 從受精開始 受精至斷奶，至少一個繁殖周期
泌乳母兔 第一次受精 分娩前兩周至斷奶

附錄B：試驗(yàn)概述表
試驗(yàn)編號： 第1頁，共 頁
受
試
物 受試物通用名稱： 有效成分：
有效成分標(biāo)示值： 有效成分實(shí)測值：
產(chǎn)品類別： 外觀性狀：
生產(chǎn)單位： 生產(chǎn)日期及批號：
樣品數(shù)量及包裝規(guī)格： 保質(zhì)期：
收(抽)樣日期： 送(抽)樣人：
抽樣地點(diǎn)：（適用時(shí)） 抽樣基數(shù)：（適用時(shí)）
試驗(yàn)
動物 試驗(yàn)動物品種：
性別： 生理階段：
起始日齡： 起始體重：
健康狀況：
動物來源和種群規(guī)模： 飼喂方式：
飼養(yǎng)條件：
時(shí)間
與
場所 試驗(yàn)起始時(shí)間： 試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間：
試驗(yàn)場所：
設(shè)計(jì)
與
分組 分組設(shè)計(jì)方法：
試驗(yàn)組數(shù)量(含對照組)： 每組重復(fù)數(shù)：
每個重復(fù)動物數(shù)： 試驗(yàn)動物總數(shù)：
日糧中有效成分添加量 日糧中有效成分含量
試驗(yàn)組1
試驗(yàn)組2
試驗(yàn)組3
……
對照物質(zhì)名稱：
(適用時(shí)) 對照物質(zhì)在日糧中添加量 對照物質(zhì)在日糧中含量

試驗(yàn)
日糧 日糧組成(營養(yǎng)素和能值)
計(jì)算值 實(shí)測值
成分1
成分2
成分3
……
日糧形態(tài) 粉料□ 顆�！� 膨化□ 其他
檢測項(xiàng)目
和
實(shí)施時(shí)間
治療和預(yù)防措施
(原因、時(shí)間、種類、持續(xù)時(shí)間等)
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
分析方法
突發(fā)狀況的處理、不良后果發(fā)生的時(shí)間及發(fā)生范圍：
結(jié)論
原始
記錄
保管
備注

試驗(yàn)人員：



項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：



報(bào)告簽發(fā)人及簽發(fā)時(shí)間：